OCLN เป็นโปรตีนทรานส์เมมเบรนที่มีโดเมนสี่ขดลวด ได้แก่ โดเมนที่ปลาย N ภายในเซลล์ หางยาวของไซโตพลาสซึมหรือที่เรียกว่าปลาย C สองลูปนอกเซลล์ EL1 และ EL2 ที่เชื่อมต่อผ่านลูปภายในเซลล์สั้นๆ ดังนั้น ในที่สุด นักวิจัยจึงพิจารณาว่าโดเมน OCLN ใดมีความสำคัญต่อการแบ่งเขตของ SARS-CoV-2 และการส่งผ่านจากเซลล์สู่เซลล์เพื่อจุดประสงค์นี้ บาคาร่า ทีมงานได้สร้างโครงสร้างการลบ OCLN สี่รายการ ได้แก่ hOCLN/ΔC, hOCLN/ΔE1, hOCLN/ΔE2 และ hOCLN/ΔN และแปลงเป็นเซลล์ OCLN KO Vero-E6 ต่อไป พวกเขายืนยันการแสดงออกของแต่ละรายการโดยใช้ Western blot และ IFAการศึกษาชี้ให้เห็นว่า OCLN ซึ่งเป็นโฮสต์แฟกเตอร์ เป็นสื่อกลางในการแพร่กระจายของ SARS-CoV-2 และการส่งผ่านจากเซลล์สู่เซลล์ที่ตามมา ดังนั้น การลดลงของมันจึงลดการแพร่กระจายของ SARS-CoV-2 ในขณะที่การแสดงออกที่มากเกินไปของมันส่งเสริมในการทดลองกับ rVSVs ที่แสดงโปรตีน S ของสายพันธุ์ SARS-CoV-2 หลายสายพันธุ์ การติดเชื้อ SARS-CoV-2 ในหลอดทดลองและในร่างกาย ลดลงอย่างชัดเจนและทำลาย OCLN อย่างสมบูรณ์ในที่สุด

rVSV ทั้งหมดที่แสดงโปรตีน S ของสายพันธุ์ SARS-CoV-2 Delta, Beta และ Kappa แสดงการส่งผ่านระหว่างเซลล์ที่ปรับปรุงดีขึ้นกว่าสายพันธุ์ WA-1 แวเรียนต์แกมมา & อัลฟ่าแสดงความสามารถที่เทียบเคียงได้เพื่อขับเคลื่อนการก่อรูปซินไซเทียมเช่นเดียวกับสายพันธุ์ WA-1 ที่น่าสนใจคือ Omicron แสดงความสามารถที่ลดลงอย่างชัดเจนเพื่อสร้าง syncytia ในเซลล์ A549-hACE2 เมื่อเทียบกับสายพันธุ์ SARS-CoV-2 และ WA-1 อื่น ๆ ซึ่งบ่งชี้ว่า Omicron มีความสามารถจำกัดในการแพร่กระจายเซลล์โดยใช้วิถี endocytic ข้อสังเกตนี้ยังให้เหตุผลว่าเหตุใดสายเลือดย่อยของ Omicron BA.1/BA.2 จึงก่อให้เกิดอาการทางคลินิกเล็กน้อยมากกว่า WA-1 และสายพันธุ์ SARS-CoV-2 อื่นๆ บาคาร่า 888

นอกจากนี้ การทดลองในการศึกษายังชี้ให้เห็นว่าการติดเชื้อ SARS-CoV-2 นั้นทำให้ OCLN ลดลง แต่มีผลกระทบต่อโปรตีน TJ อื่นๆ เพียงเล็กน้อย เช่น Claudin-1 การศึกษาในอนาคตควรตรวจสอบกลไกที่อยู่ภายใต้กลไกของการควบคุมการสังเคราะห์และความเสถียรของโปรตีน OCLN ใน TJs ที่เกิดจาก SARS-CoV-2 ในเซลล์ที่อนุญาตของ SARS-CoV-2 การลดลงของ OCLN ไม่ส่งผลกระทบต่อการแสดงออกของเอนไซม์ angiotensin-converting 2 (ACE2) แต่ลดการติดเชื้อไวรัสอย่างเห็นได้ชัด โดยเฉพาะอย่างยิ่งในระหว่างขั้นตอนการทำให้เป็นภายในและการจำลองแบบของไวรัสที่ตามมา ในทางกลับกัน การแสดงออกที่มากเกินไปทำให้ทั้งการจำลองภายในและการจำลองแบบของ SARS-CoV-2 ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ แต่ไม่มีผลผูกพัน ดังนั้นจึงไม่ถือว่า OCLN เป็นตัวรับหรือตัวรับร่วมสำหรับการเข้าสู่ SARS-CoV-2

ผลการศึกษายังเผยให้เห็นว่าวิถีการเข้าสู่เอนโดโซมมีส่วนร่วมในการส่งผ่านเซลล์ต่อเซลล์ SARS-CoV-2 ที่ใช้ OCLN ในที่สุด การรักษาด้วยทริปซินส่งเสริมการแพร่เชื้อ SARS-CoV-2 จากเซลล์สู่เซลล์อย่างชัดเจนและเพิ่มจำนวนไวรัสในเซลล์โฮสต์ ซึ่งบ่งชี้ว่าปรากฏการณ์นี้ช่วยรักษาการติดเชื้อไวรัสและการแพร่เชื้อได้มากกว่าการแพร่เชื้อโดยไม่ใช้เซลล์

ข้อสรุปการศึกษาในปัจจุบันให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกในการเข้าสู่ SARS-CoV-2 และการแพร่กระจายที่ตามมาภายในมนุษย์ นักวิจัยนำเสนอหลักฐานที่ชัดเจนของการส่งผ่านระหว่างเซลล์ต่อเซลล์ของ OCLN ที่ขับเคลื่อนด้วย WA-1 และสายพันธุ์ SARS-CoV-2 อื่น ๆ ทั้งหมดที่ตรวจสอบในการศึกษานี้ แท้จริงแล้ว OCLN เป็นปัจจัยโฮสต์ที่สำคัญที่เกี่ยวข้องกับการทำให้ภายใน SARS-CoV-2 และการแพร่เชื้อไวรัสจากเซลล์สู่เซลล์ตามมา